索氏抽提法提取粗脂肪適用于脂類含量較高,結合態的脂類含量較少,能烘干磨細,不易吸濕結塊的樣品。
特點:操作簡單,易提取,實驗結果容易計算。
索氏抽提法,用于粗脂肪含量的測定。脂肪廣泛存在于許多植物的種子和果實中,測定脂肪的含量,可以作為鑒別其品質優劣的一個指標。脂肪含量的測定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、電測和核磁共振法等。目前國內外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是的經典方法,也是我國糧油分折的標準方法。
實驗原理
采用索氏抽提法中的殘余法,即用低沸點有機溶劑(或石油醚)回流抽提,除去樣品中的粗脂肪,以樣品與殘渣重量之差,計算粗脂肪含量。由于有機溶劑的抽提物中除脂肪外,還或多或少含有游離脂肪酸、甾醇、磷脂、蠟及色素等類脂物質,因而抽提法測定的結果只能是粗脂肪。
實驗材料
油料作物種子、中速濾紙
儀器裝置
(1)索氏脂肪抽提器或JT-SXT-06型油分測定器
(2)干燥器(直徑15~18cm,盛變色硅膠)
(3)不銹鋼鑷子(長20cm)
(4)培養皿
(5)分析天平(感量0.001g)
(6)稱量瓶
(7)恒溫水浴
(8)烘箱
(9)樣品篩(60目)
試劑
無水或低沸點石油醚(A.R.)
實驗步驟
(1)切片
將濾紙切成8cm×8cm,疊成一邊不封口的紙包,用硬鉛筆編寫順序號,按順序排列在培養皿中。將盛有濾紙包的培養皿移入105±2℃烘箱中干燥2h,取出放入干燥器中,冷卻至室溫。按順序將各濾紙包放人同一稱量瓶中稱重(記作a)、稱量時室內相對濕度低于70%。
(2)包裝干燥
在上述已稱重的濾紙包中裝入3g左右研細的樣品,封好包口,放入105±2℃的烘箱中干燥3h,移至干燥器中冷卻至室溫。按順序號依次放入稱量瓶中稱重(記作b)。
(3)抽提
將裝有樣品的濾紙包用長鑷子放入抽提筒中,注入一次虹吸量的1.67倍的無水,使樣品包浸沒在中。連接好抽提器各部分,接通冷凝水水流,在恒溫水浴中進行抽提,調節水溫在70~80℃之間,使冷凝下滴的成連珠狀(120~150滴/min或回流7次/h以上),抽提至抽取筒內的用濾紙點滴檢查無油跡為止(約需6~12h)。抽提完畢后,用長鑷子取出濾紙包,在通風處使揮發(抽提室溫以12~25℃為宜)。提取瓶中的另行回收。
(4)稱重
待揮發之后,將濾紙包置于105±2℃烘箱中干燥2h,放入干燥器冷卻至恒重為止(記作c)。
計算結果
粗脂肪含量(%)=( b-c)/(b-a) ×100
式中:a:稱量瓶加濾紙包重(g)
b:稱量瓶加濾紙包和烘干樣重(g)
c:稱量瓶加濾紙包和抽提后烘干殘渣重(g)